免疫学实验已经成为蛋白质科学研究领域难以替代的重要实验方法。通过将“可以与待测分子结合的特异性抗体”和“易于被检测到的标记物”二者相偶联的方法，研究人员已经获得了高效且特异检测样本中靶标的有效工具。而且随着检测手段的更新迭代，越来越多的标记物类型也花样翻新，大有“乱花渐欲迷人眼”之势。那么，如何才能在种类繁多的抗体偶联物中找到合适自己的那一个呢？今天就让我们为你拨开迷雾，一探究竟。
其实，作为标记的偶联物种类虽多，但其实最常用偶联物只有3个大类，即：酶标记、荧光标记和生物素标记。 HRP标记往往是样本单靶点检测的首选，但当需要对同一样本中的多个靶点进行多通道检测时，荧光标记抗体则提供了一种更好的选择。各类荧光标记，如：AF系列、Cy系列、FITC、罗丹明等为研究人员们提供了极大地选择空间，因此被广泛应用于免疫荧光染色 (IF), 流式细胞术 (FC), 和荧光免疫印迹 (FWB)实验中。选择荧光标记时，荧光相对强度和光谱分离度的选择最为重要。由于激光光源、检测设备等的不同，不同的荧光标记在不同的设备上具有不同的荧光强度。因此，选择荧光标记物时，需要结合实验室设备的特点和蛋白丰度，以确保最亮的标记物和表达水平最低的蛋白相互组合。此外，“串光”问题会在荧光实验中带来非常大的不利影响，并直接影响结果的可信度。因此，荧光标记物发射光谱应尽可能地彼此远离，以避免邻近通道间荧光信号的串扰。如果难以确认最佳荧光标记的种类，优先去尝试AF488, Cy5, FITC, PE等文献中最常用到的荧光标记通常是较为稳妥的选择。 好的开始是成功的一半，辛苦实验的你不需要为选择标记抗体而苦恼。给博奥森一份信任，我们还你的不只是一支好抗体！
