作者：江阴齐氏生物科技有限公司 2014-05-14T09:40 (访问量:1857)
1.组织源：4-6周龄C57小鼠
2.性别：雄性
3.消毒方法：75%酒精消毒， 基础培养液+ Penicillin+ Streptomycin清洗
4.培养用液
基础培养液：DMEM/F12
添加因子：Penicillin；Streptomycin；10%FBS
5.消化方式：
成分：含0.1%Collagenase-1基础培养液
时间：3h
温度：37℃
6.细胞原代分离、培养基本操作步骤：
a.颈椎脱臼法处死C57小鼠，腹部喷75%酒精消毒，无菌条件下取出气道组织；
b.去除气道组织表面的结缔组织，基础培养液清洗2次，纵向剖开气道，露出内膜，用刀片轻轻刮去内膜，然后再用基础培养液清洗1次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
c.加入5ml胶原酶消化液，37℃消化3h，每30min轻轻充分吹打细胞消化液，使细胞尽量脱落；
d.用200目细胞筛滤去未消化部分组织，之后1200rpm离心5min；
e.弃上清，沉淀细胞加5ml完全培养液重悬，接种于25cm2培养瓶，37℃、5%CO2培养箱中培养；
f.第3天开始换液，之后每3天换液1次，80%细胞已融合时进行传代。
地 址： 江阴市国家高新区东盛西路6号A7-1栋
联系人： 齐治安
电 话： 0510-86419770
传 真： 0510-86419769
Email：sales@chiscientific.cn
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